Nemrég a Science Translational Medicine folyóiratban tették közzé Chunhong Ma, Chunyang Li és Xinyin Liu legújabb kutatási eredményeit a Shandong University Qilu Medical College-ból.
Több mint 200,{1}} vegyület átvizsgálása után a kutatócsoport sikeresen azonosított egy kis molekulájú vegyületet, az ML-T7-et, amely a TIM-et célozza meg-3. Az in vivo és ex vivo kísérletek eredményei azt mutatták, hogy az ML-T7 képes volt fokozni a CD8-pozitív T-sejtek és CAR-T-sejtek daganatellenes aktivitását, és a kezelés önmagában közvetlenül gátolta a tumor progresszióját egereket, és szinergista hatást fejtett ki a PD-1 inhibitorokkal.
A TIM-3 egy membránfehérje, amelynek IgV strukturális doménjében egyedülálló szerkezetű, FG-CC' hasadékként ismert, amely egy erősen konzervált kötőhely a ligandum foszfatidil-szerin (PtdSer) és a karcinoembrionális antigénhez kapcsolódó sejtadhéziós molekula számára. 1 (CEACAM1).
A TIM-3 egy membránfehérje, amelynek IgV strukturális doménjében egyedülálló szerkezetű, FG-CC' hasadékként ismert, amely egy erősen konzervált kötőhely a ligandum foszfatidil-szerin (PtdSer) és a karcinoembrionális antigénhez kapcsolódó sejtadhéziós molekula számára. 1 (CEACAM1).
Ebben a tanulmányban a csapat a Specs adatbázisban található 204 380 kis molekulájú vegyületből azonosította az ML-T7-et egy virtuális szűréssel, amelyet funkcionális szűrési stratégiával kombináltak.
Olyan technikák alkalmazásával, mint a felszíni plazmonrezonancia (SRP), valamint a molekuláris dinamika és a kristályszerkezet elemzése, a csapat megerősítette, hogy az ML-T7 specifikusan megcélozza a TIM-3 FG-CC' hasadását, és nagyobb affinitása a TIM{{ 4}}, mint a PtdSer és a CEACAM1. Az ML-T7 stabilizálja a TIM-3-hoz való kötődését az FG-CC' hasadékon keresztül, megszakítva a TIM-3 kötődését a PtdSerhez, a CEACAM1 kötődést és interakciót.
Az ML-T7 szűrése és jellemzése
Az in vitro kísérletek és az egérmodell-kísérletek eredményei azt mutatták, hogy a TIM-3 célzásával az ML-T7 képes volt elősegíteni a CD8-pozitív citotoxikus T-sejtek túlélését, proliferációját és daganatellenes aktivitását, és megakadályozni a funkcionális működést. kimerülés. Az ML-T7 kezelés az IL-2/STAT5 jelátviteli útvonal felszabályozását, az effektor faktorok, például az IFN-, TNF- és IL-2 fokozódását, valamint az aktivációs markerek expresszióját eredményezte. (CD25 és CD69), valamint az őssejtjellemzéssel kapcsolatos citokin (TCF1) expressziós szintje emelkedett; éppen ellenkezőleg, a depléciós markerek, például a PD-1 és a CTLA-4 expressziója csökkent, és a terminálisan kimerült T-sejtek aránya lecsökkent.
A veleszületett immunrendszerből származó természetes gyilkos sejteket, a dendritikus sejteket és azok funkcióit a TIM hasonlóan negatívan szabályozta{0}}. Különösen a dendritikus sejtekben a TIM-4 specifikusan magas expressziója is előfordul. A kutatócsoport megállapította, hogy az ML-T7 nemcsak a természetes ölősejtek ölőaktivitását fokozza, hanem elősegíti a dendritikus sejtek érését és fokozza antigénprezentáló képességüket a TIM-3 és TIM-4 hatására. .
Különféle primer hepatocelluláris karcinóma egérmodellekkel figyelték meg az ML-T7 terápiás hatásait. Az eredmények azt mutatták, hogy az ML-T7 20 mg/ttkg vagy 50 mg/ttkg dózisú, kétnaponta intraperitoneálisan injektált kezelés jelentősen gátolta a tumor növekedését és meghosszabbította az egerek túlélési idejét, valamint gyengítette a tumor mikrokörnyezet immunszuppresszív jellegét a ellenőrző csoport.
További vizsgálatok kimutatták, hogy a 20 mg/kg ML-T7-kezelés önmagában hasonló daganatellenes hatást fejtett ki, mint a 100 mg/kg PD-1-gátló önmagában végzett kezelés, és a kettő együtt alkalmazva szinergikus hatást fejtett ki. , újraaktiválja a CD8-pozitív T-sejteket és a természetes gyilkos sejteket a tumor mikrokörnyezetében. 120 nappal a kombinációs kezelés után az egerek 50%-a élte túl (3/6 egér), míg az ML-T7 vagy PD-1 inhibitorral önmagában kezelt egerek alig élték túl (0/6 egér vagy 1/6 egér). túlélte).
A PD-1-gátlókkal végzett kombinációs terápia hatása
Ezen túlmenően, az ML-T7 kezelés jelentősen fokozhatja a CAR-T sejtek tumorsejtekkel szembeni citotoxicitását, miközben a CAR-T sejtek apoptózisát és fokozott proliferációját indukálhatja a nyilvánvaló metasztázis után. Sőt, az ML-T7 kezelés hatékonyan legyőzte a CAR-T sejtterápia nehéz problémáját, azaz megakadályozta a funkcionális kimerülést, így javítva a CAR-T sejtek hatékonyságát, amelyben 10 μM ML-T7 volt a leghatékonyabb a CAR-T sejt visszafordításában. kimerülés.
A CAR-T sejtek fokozására
Ami a biztonságot illeti, az ML-T7 jól tolerálható volt, és a kétnaponta intraperitoneálisan beadott 50 mg/kg dózisú ML-T7 kezelés nem okozott jelentős nemkívánatos eseményeket egerekben.
Összességében ez a tanulmány bemutatta az ML-T7-ben, a TIM-3 kis molekulájú gátlójában rejlő nagy potenciált a tumor immunterápiában való alkalmazásában. Az ML-T7 nemcsak az egyedüli küzdelemben jó, hanem képes fokozni az anti- a CAR-T sejtterápia és a PD-1 inhibitor terápia tumoraktivitását, amely biztonságos és hatékony, és érdemes továbbfejleszteni a klinikai transzláció érdekében.
